近期，随着经济的复苏，维生素类饲料添加剂销售量大大增加，尤其是维生素E饲料添加剂，所以饲料中维生素E的检测就显得尤为紧急和重要。

九九科技应用检测部参考国标（GB/T 17812-2008），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪经实践检测可提供饲料中维生素E的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚）的测定，仅供广大用户参考。

以下是维生素E的测定的详细检测方法。

1   仪器与试剂

1.1 仪器
　　LC-10Tvp高效液相色谱仪
　　Vertex 色谱柱　：150mm×4.6mm×5μm
　　分析天平，感量为0.0001g
　　 圆底烧瓶，带回流冷凝器
　　恒温水浴锅
　　旋转蒸发器
　　 超纯水器

1.2  试剂

碘化钾溶液。
　　淀粉指示液。
　　硫代硫酸钠溶液。
　　水乙醚:不含过氧化物。
　　无水乙醇。
　　1,4-二氧六环。
　　甲醇，色谱纯。
　　2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）。
       氢氧化钾溶液。
　　酚酞指示剂。
　　氮气（纯度99%）。
　　L-坏血酸。
　　维生素E（dl-α-生育酚）对照品。

2    试样溶液的制备

2.1  皂化
　　称取适量试样，置入圆底烧瓶中，加L-坏血酸乙醇溶液，使试样完全分散、浸湿，置于水浴上加热直到沸点，用氮气吹洗稍冷却后，加氢氧化钾溶液，混合均匀，在氮气流下沸腾皂化回流，不时震荡防止试样粘附在瓶壁上，皂化结束，分别用无水乙醇、水自冷凝管顶端冲洗其内部，取出烧瓶冷却至40℃。

2.2 提取
　　定量的转移全部皂化液于盛有无水乙醚的分液漏斗中，用蒸馏水分2次~3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗，加盖、放气，随后混合，激烈震荡，静置、分层。转移水相于第二个分液漏斗中，分次用乙醚重复提取两次，弃去水相，合并三次乙醚相。用蒸馏水多次洗涤乙醚提取液至中性，初次水洗时轻轻旋摇，防止乳化。乙醚提取液通过无水硫酸钠脱水，转移到棕色容量瓶中，加BHT使之溶解，用乙醚定容至刻度。

2.3 浓缩
　　从乙醚提取液中分取一定体积置于旋转蒸发器烧瓶中，在部分真空、水浴温度50℃的条件下蒸发至干或用氮气吹干。残渣用甲醇溶解并稀释，离心或通过0.45μm过滤膜过滤，用于高效液相色谱仪分析。

3   色谱条件
　　色谱柱：Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm；
　　流动相：甲醇+水=95+5；
　　流速：1.0mL/min;
　　温度：室温；
　　进样量：20μL。

4   生育酚醋酸酯标准品的高效液相色谱图