液相色谱仪分析中长时间连续地使用柱，填料的组分会发生变化。强滞留组分可能被永久性地“键合”于填料上，或者填料表面发生化学附着，键合相可能被部分地去掉，引起保留的变化。

　　污染物的吸附

　　填料表面积累性地吸附样品中强保留组分，使填料表面阻塞，所有组分保留减少，塔板数下降，可以看到柱头填料变色或稍有损失。可用两种处置方法：1用保护柱;2用强留东西冲洗去掉脏污。用反冲的方法更有效，让柱放空而不通过检测池。

　　键合相损失

　　在使用液相色谱仪柱过程中，键合相的有机层会慢慢损失。应避免使用极端的pH值。水和甲醇似乎加速了这种进程，因而反相柱键合相的损失是一个特殊问题。

六玄网　　用硅胶保护柱可减慢键合相的损失，尽管有些不方便，但仍有人首选使用。也有人采用在线重新键合有机相方法，但程序比较麻烦，花时间太多，而且也不一定能恢复到原来柱的性能。

　　柱过载和介质效应

六玄网　　柱过载，一般情况是峰拖尾，保留时间减小，高浓度样品更严重。减少进样量常客服。样品的组成有下列情况也可使柱过载，这就是介质效应。