
九九科技推出猪血中免疫球蛋白IgG的高效液相HPLC检测方案
【免疫球蛋白】
免疫球蛋白:指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中,可溶性免疫球蛋白存在于体液中,参与体液免疫 ,也见于其他组织和一些分泌液中。人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白(γ-球蛋白)中。免疫球蛋白可以分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五类。
【IgG生理作用】
人体血清免疫球蛋白IgG是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体,它仅以单体形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗体属于IgG,它在抗感染中起到主力军作用,它能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用(调理作用),中和细菌毒素的毒性(中和毒素)和病毒抗原结合使病毒失去感染宿主细胞的能力(中和病毒)。IgG 在机体合成的年龄要晚于IgM,在出生后第3 个月开始合成,3-5 岁接近成年人水平。它是唯一能通过胎盘的Ig,在自然被动免疫中起重要作用。此外,IgG 还具有调理吞噬和结合SPA等作用。
以下是九九科技利用STI501高效液相色谱仪对猪血中免疫球蛋白IgG进行的HPLC检测方案。
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1、仪器与试剂
1.1仪器、设备
STI501高效液相色谱仪
蛋白柱
九九 分析天平
PH计
容量瓶
九九 针头过滤器
九九 微孔滤膜:0.45µm
1.2试剂
磷酸二氢钾(AR)
九九 磷酸氢二钾(AR)
2、供试品溶液和对照品溶液的制备
对照品溶液的制备 取IgG标准品0..01g,用流动相A溶解并定容至10.0ml,摇匀,即得标准储备液,浓度为1mg/ml;取适量该储备液用流动相A稀释成含IgG0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml的标准系列,临用时配制。
九九供试品溶液的制备 称取一定量的血浆蛋白粉试样约0.1g于容量瓶中,用流动相A稀释至25.0ml,摇匀,经0.45um微孔滤膜过滤后进样分析。
3、色谱条件
色谱柱:蛋白柱
流动相:流动相A:PH6.5,0.05mol/l磷酸盐缓冲液
流动相B:PH2.5,0.05mol/l甘氨酸盐缓冲液
九九 梯度洗脱程序见下表
九九 波长:280nm
流速:0.4mL/min
九九 进样量:20ul
温度:室温
梯度洗脱程序
4、测定法
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul,注入液相色谱仪,测定,即得
5、谱图
技术与服务
TECHNICAL SERVICES